DNS試劑(Ghose法)檢測原理

閱讀次數：258 發布時間：2024/3/14 13:14:27

DNS試劑(Ghose法)檢測原理

產品簡介：

Ghose法DNS試劑。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分,定量檢測植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。

檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物。在一定范圍內，還原糖的量與棕紅色產物的顏色深淺程度呈一定比例關系。在540nm處測定棕紅色物質的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關系。

【產品名稱】：DNS試劑(Ghose法) 【產品規格】：500ml

【儲存條件】：2-8℃

【有效期】：12個月

操作步驟(僅供參考)：

1、還原糖的提?。?/span>

①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉移至該容器②50℃水浴30min，并不時攪拌，以便還原糖徹底浸出

③將沉淀和浸出液轉移至50ml離心管，4000g離心5min。

④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。

⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測液。

2、總糖的水解和提?。?/span>

①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉移至該容器。

②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時攪拌。

③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液，檢查水解是否完全，如已經水解完全則不顯示藍色。

④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4左右，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min或過濾，獲得上清或濾液。

⑤取上清或濾液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液)，取1ml總糖水解液，測定其還原糖的含量。

注意事項：

1、該試劑避免反復凍融，以免失效或效率下降，盡量避光保存。

2、稀釋鹽酸和氫氧化鈉溶液時，應小心操作，避免傷人。

3、一般市售的濃鹽酸摩爾數約為11.6M，應稀釋至6M后使用。

4、待測樣本如不能及時測定，應置于2~8℃保存，3天內穩定。

5、如果樣品還原糖濃度過高，應用蒸餾水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數。6、總糖計算公式在測定干擾雜質很少、還原糖含量相對總糖含量很少時使用，×0.9是為了從測定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時所消耗的水量。