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      主營產品:elisa試劑盒,進口elisa試劑盒,elisa kit,進口血清,進口試劑,明膠酶譜法檢測試劑盒,大鼠elisa檢測試劑盒,人elisa檢測試劑盒

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      技術文獻

      β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測定試劑盒的測定

      閱讀次數:4884    發布時間:2023/12/6 15:59:50

       β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測定試劑盒的測定

      比色法 50 /24 樣)

      一、測定原理:

      β-N-         

      β-N-Acetylglucosaminidase,NAG)廣泛存在于各種組

      織器官、體液、紅細胞、白細胞及血小板中,是溶酶體

      中的一種酸性水解酶。底物在 NAG 作用下水解,釋放

      出游離的對硝基酚。加入堿性溶液停止反應,并使對硝

      基酚顯色。在 400nm 處測吸光度,可計算酶活力單位。

      二、試劑組成及配制: (試劑 2-8℃保存,有效期 個月)

      試劑一:溶液 40mL×1 瓶。

      試劑二:底物,粉劑×1 支。

      試劑三:終止劑 60mL×2 瓶。

      試劑四:液體 6mL×1 瓶。(天冷會有結晶析出,測試前

      置于 37℃水浴直至透亮)

      試劑五:3mmol/L 對硝基酚標準貯備液 2mL×1 瓶。

      0.6mmol/L 對硝基酚標準應用液的配制: 3mmol/L 

      硝基酚標準貯備液用蒸餾水作 倍稀釋,即

      3mmol/L 對硝基酚∶蒸餾水=1稀釋。

      底物緩沖液的配制:底物溶解度小,配制底物溶液時,

      應先用適量試劑一將試劑二粉劑 支調成糊

      狀,再邊攪拌邊逐漸加試劑一到 30mL,混勻

      至溶解(不可加熱)。配好后的底物緩沖

      液為過飽和溶液,如有結晶,可靜置或離心后

      取上清進行檢測。用不完的底物緩沖液 4℃

      保存兩個月以上。

      三、操作步驟:

       

      五、注意點:

      1、用分光光度計測定時吸光度至 0.60 或酶活力至 60 單位

      呈線性,超出此范圍應將標本用生理鹽水稀釋后重測,

      結果乘以稀釋倍數。

      2、尿酶濃度隨尿流率而變動,因此尿酶測定要求留取 24

      小時尿;但因留 24 小時尿不方便,也不準確,故用

      單位/肌酐比值計算酶排出率,效果較好。

      附錄Ⅰ: 大鼠腎皮質中 NAG 的測定

      1、 樣本前處理:

      準確稱取樣本的重量,按照重量(g):體積(mL)=1 9

      的比例,加入 倍體積的生理鹽水,冰水浴條件下機械勻

      漿,制成 10%勻漿,2500 /分,離心 10 分鐘,取上清

      再用生理鹽水稀釋成 1%的勻漿液待測。(該勻漿濃度僅

      為參考用,客戶測定時可以根據這一濃度自行摸索樣本的

      實際所需濃度)

      2、 操作步驟:

        β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測定試劑盒的測定

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