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閱讀次數:4915 發布時間:2023/12/27 14:39:25
維生素B1檢測試劑盒(熒光光度法)的注意事項
產品簡介:
維生素 B1(Vitamin B1)又稱硫胺素,屬于水溶性維生素,在有氧化劑存在時容易被氧化產生脫氫硫胺素,后者在有紫外光照射時呈現藍色熒光。維生素B1檢測試劑盒(熒光光度法)是利用 Vitamin B1溶液在性鹽溶液中能被氧化成藍色的硫色素(一種熒光化合物),在紫外線下硫色素發出熒光,在激發波長365nm,發射波長 435nm,在沒有其他熒光物質干擾時熒光強度與硫色素的濃度呈正比,可定量檢測維生素 B1的含量,如果樣品中存在干擾物質,可用沸石吸附 Vitamin B1以便去除待測樣品中千擾熒光測定的雜質。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):1、稀釋組織勻漿液 : 按組織漿液(10x)蒸水=1: 9 的比例稀釋,獲得 1組織漿液2、稀釋標準品: 取適量的 Vitamin B,標準(100pg/ml),按 Vitamin B標準(100pg/ml):蒸水=1: 99 稀釋成 Vitamin B,標準(1pg/ml),4C避光保存3、制備亞硫酸鹽工作液 : 取一支過劑-亞硫酸鹽 100mg 粉末,充分解于 0.5ml 蒸水中配制成200mg/ml的亞硫酸鹽工作液,即配即用(選做)制備樣品: 取待測材料如麥等,準確稱量 2~5g,加入研磨器內,加入少量 1x4組織勻漿液,研磨碎,再次用 1x組織勻漿液研磨,一井倒入 50ml 離心管,補充1*組織勻漿液至25ml,充分混勻,沸水中育 30min,冷卻至室溫,用樣品校正液調節 pH至4.5,3500g 離心10min,取上清加入 2g沸石,振搖 30min,棄液,燕遛水清洗沸石2次,棄洗液,加入 2.5ml 樣品洗脫液攪拌沸石,洗脫 2~3 次,將洗脫液合并,并用樣品洗脫液定容至 10ml,即為樣品凈化液5、Vitamin B,氧化: 按下表操作,注意避光操作。劇烈振搖 90s,靜置分層,吸取下層溶液丟棄;上層洛液加入 1.5 硫酸鹽混勻使脫水。6、Vitamin B,檢測 :選用恰當的濾色片,測定的激發波長為 365nm,發射波長為 435nm提前預熱儀器 30min,分別檢測測定管和標準管的熒光值,同時向空白管和標準空白管的利余液中加入 0.05ml亞硫酸鹽工作液,立即混勻,在 20~30s 內測出各管的熒光值,作為各自的空白值。
注意事項
1、在上述操作中,要嚴格避免 Vitamin B,受到陽光直射2、待測樣品如不能及時測定,應置于 28“C保存,3 天內穩定3、如果樣品濃度過高,應用蒸館水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數
有效期;6 個月有效;4C運輸,4°C保存
維生素B1檢測試劑盒(熒光光度法)的注意事項
原創作者:南京信帆生物技術有限公司